轉(zhuǎn)染細(xì)胞一般用flag檢測(cè)表達(dá)情況。如果有標(biāo)簽可以做WB來鑒定是否表達(dá)。用熒光載體或QPCR檢測(cè)是否轉(zhuǎn)染細(xì)胞。若質(zhì)粒沒有加熒光可以用QPCR檢測(cè)。

1、引物 更換引物嘗試，設(shè)置陽性對(duì)照（其他同載體的質(zhì)粒）和陰性對(duì)照（空載體）看是否引物問題。
2、PCR擴(kuò)增體系 一般問題不大，可以看下退火溫度等信息。
3、抗性是否加錯(cuò)，抗性濃度是否正常。

選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)需考慮蛋白質(zhì)的大小、復(fù)雜性、翻譯后修飾需求、表達(dá)量和純度要求。原核系統(tǒng)適用于簡(jiǎn)單蛋白，哺乳動(dòng)物系統(tǒng)適用于復(fù)雜蛋白。

包涵體形成通常是由于蛋白質(zhì)在細(xì)胞中錯(cuò)誤折疊導(dǎo)致的。這可能與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)復(fù)雜性或高表達(dá)量有關(guān)。

內(nèi)毒素可以通過內(nèi)毒素去除柱、離子交換色譜等方法去除，確保最終產(chǎn)品的純度和安全性。

定點(diǎn)突變技術(shù)被廣泛地應(yīng)用于蛋白質(zhì)功能位點(diǎn)結(jié)構(gòu)研究、酶活性優(yōu)化、DNA元件功能或元件互作、基因治療等方面。

是的，我們的定點(diǎn)突變服務(wù)可以在DNA的任何位點(diǎn)引入突變。

可能為誤操作，請(qǐng)按照說明書操作步驟重復(fù)檢測(cè)，并確認(rèn)樣本中添加的裂解和萃取試劑濃度在推薦范圍內(nèi)。也可能是檢測(cè)卡超過效期，請(qǐng)使用效期內(nèi)的檢測(cè)卡。

當(dāng)樣本濃度低于檢測(cè)卡的工作濃度范圍下限時(shí)，可降低樣本稀釋倍數(shù)，稀釋后重新檢測(cè)；當(dāng)樣本濃度高于檢測(cè)卡的工作濃度范圍上限時(shí)，可以進(jìn)行二次稀釋使其濃度符合檢測(cè)卡的工作范圍。

說明待測(cè)樣本中不含有標(biāo)簽蛋白。檢查是否使用了與待測(cè)樣本對(duì)應(yīng)的檢測(cè)卡，或者通過ELISA或WB方法驗(yàn)證標(biāo)簽蛋白的存在。

編輯質(zhì)?？梢酝ㄟ^多種方法轉(zhuǎn)染到目的細(xì)胞中，包括病毒感染（如慢病毒、腺病毒等）、電穿孔、脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等。選擇哪種方法取決于細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)條件。

驗(yàn)證編輯的效果通常涉及對(duì)編輯后的細(xì)胞進(jìn)行基因組測(cè)序、PCR擴(kuò)增和測(cè)序、表型分析等。這些方法可以幫助確定哪些基因或基因組的哪些位置被成功編輯，并評(píng)估編輯的效率和準(zhǔn)確性。