多克隆抗體特點:
1.識別任一抗原上的多個表位,所得血清為異質性抗體混合物,親和力各有不同
2.主要有IgG亞類組成
3.通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標的多克隆抗體,尤其是針對高同源性蛋白家族
優(yōu)劣勢:
1. 高親和性:由于靶蛋白上的多個表位能夠結合不止一個抗體分子,多抗可放大低表達水平靶蛋白的信號
2.可識別多個表位,有利于免疫沉淀和染色質免疫沉淀實驗獲得更好的結果
3.與相似抗原有更多交叉反應,可放大低表達信號,染色背景干擾較高
4.對微小抗原變化的包容性更強,可檢測同源性的蛋白家族
單克隆抗體特點:
1. 識別一個抗原上的單一抗原表位
2.僅由一種抗體亞型組成(IgG1、IgG2、IgG3)如需使用二抗進行檢測,應針對正確的亞類選擇抗體
優(yōu)劣勢:
1.高特異性:單抗適用于實驗中的一抗,產生背景染色信號通常顯著低于多克隆抗體
2.與多抗相比,同質性較高,結果重現性較高
3.特異性地檢測一個靶表位,不易與其它蛋白發(fā)生交叉反應,染色背景干擾低
4.檢測單一抗原或蛋白質家族的單一成員